イソニアジドは，結核菌の核酸合成経路の阻害し，細胞分裂を抑制することにより抗結核菌作用を示す．

イソニアジドは，結核菌に特異的な細胞壁成分であるミコール酸の合成を阻害し，細胞壁合成を阻害することにより抗結核菌作用を示す．