エドロホニウム塩化物はコリンエステラーゼのエステル部位と結合することにより，コリンエステラーゼ活性を阻害する.

エドロホニウムはコリンエステラーゼの陰性部分に結合して酵素活性を比較的短時間阻害する. その阻害作用時間の短さを利用して重症筋無力症の診断薬として使用される.